BEL-7402人肝癌細胞操作步驟
點擊次數:18 更新時間:2025-07-24
在完成BEL-7402人肝癌細胞的復蘇和傳代后,下一步需進行細胞培養的日常觀察與換液操作。首先,將培養瓶置于倒置顯微鏡下,觀察細胞的生長狀態及密度。健康的BEL-7402細胞通常呈多邊形或梭形,貼壁生長,若發現細胞形態異常(如變圓、脫落或出現空泡),可能提示污染或培養條件不佳,需及時處理。
當細胞密度達到80%-90%時,即可進行換液。換液前需預熱培養基(含10%胎牛血清的DMEM)至37℃,隨后在超凈工作臺中棄去舊培養基,用預熱的PBS輕柔洗滌細胞2次,以去除代謝廢物和死細胞。注意避免直接沖擊細胞層,防止細胞脫落。洗滌后,加入新鮮培養基,體積以覆蓋瓶底為宜(如T25培養瓶加入5-6mL)。
若需進行后續實驗(如藥物處理或轉染),建議在換液后24小時內操作,此時細胞處于對數生長期,狀態最佳。對于長期培養,需每隔2-3天換液一次,并定期傳代以維持細胞活性。每次操作后,需詳細記錄細胞狀態、傳代次數及實驗條件,以確保實驗可重復性。